DE2929170C2 - Meßeinrichtung zur Ermittlung des Fluoreszenz-Emissionsspektrums von Partikeln - Google Patents
Meßeinrichtung zur Ermittlung des Fluoreszenz-Emissionsspektrums von PartikelnInfo
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Description
a) das den Trägerstrom (1 *) durchsetzende Strahlenbündel
(16) eine in Richtung des Trägerstroms (14) orientierte und eine Meßstrecke (A—(^festlegende Breite aufweist,
b) das weitere Linsensystem (24) die Meßstrecke (A-C) auf der Filtereinrichtung (28) in Form
einer Abbildungsstrecke (A'— C) abbildet und
c) die Filtereinrichtung (28) in Richtung der Abbildungsstrecke (A'-C')ein von der Wellenlänge
fortlaufend abhängendes Durchlaßverhalten hat.
2. Meßeinrichtung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß der Strahlungsempfänger einen
einzigen lichtelektrischen Wandler aufweist, auf den eine hinter der Filtereinrichtung (28) angeordnete
Fokussiereinrichtung (30) gerichtet ist
3. Meßeinrichtung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß der Strahlungsempfänger mehrere
lichtelektrische Wandler aufweist, von denen jeder Strahlung aus einem anderen Bereich der
Abbildungsstrecke (A'— C'^ompfängt.
4. Meßeinrichtung nach einem der Ansprüche 1 *o
bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß ein auf die Meßstrecke (A-C) gerichteter Streulichtdetektor
(38) den Zeitpunkt des Beginns der Spektralauswertung eines Partikels steuert.
5. Meßeinrichtung nach einem der Ansprüche 1 4^
bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß die Filtereinrichtung (28) ein Keilfilter ist.
6. Meßeinrichtung nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß die Filtereinrichtung
(28) ein Prisma ist. so
7. Meßeinrichtung nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß die Filtereinrichtung
(28) ein Strichgitter ist.
8. Meßeinrichtung nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß der
Strahlungsquelle (18) als Linsensystem eine Bündelungsvorrichtung (19) im Strahlengang nachgeschaltet
ist, die das Strahlenbündel (16) derart auf die Meßstrecke (A— C)bündelt, daß das Strahlenbündel
koaxial zu dem Trägerstrom (14) verläuft. bü
Die Erfindung betrifft eine Meßeinrichtung zur Ermittlung des Fluoreszenz-Emissionsspektrums von in
einem fließenden Trägerstrom enthaltenen Partikeln, mit einer ein Strahlenbündel durch den Trägerstroni
hindurchschickenden Strahlungsquelle, einem im Strahlungsweg vor dem Trägerstrom befindlichen Linsensystem,
welches das Strahlenbündel auf den Trägerstrom leitet, und einem hinter dem Trägerstrom angeordneten
weiteren Linsensystem, welches die Strahlen auf eine Feuereinrichtung mit variierender Wellenlängendurchlässigkeit
leitet, und mit mindestens einem hinter dieser Filtereinrichtung angeordneten Strahlungsempfänger.
Das Fluoreszenz-Spektrum farbiger oder nichtfarbiger Partikel, wie Zellen des menschlichen Körpers, kann
wertvolle Informationen über die Art der Zellen und/oder den Zustand der Zellen liefern. So sind
beispielsweise die Emissionsspektren verschiedener farbiger Partikel innerhalb des Blutes unterschiedlich.
Man kann daher eine Zählung der verschiedenen Arten weißer Blutkörperchen vornehmen, da die Emissionsspektren
dieser Zellen unterschiedlich sind. Ferner ist bekannt, daß die Emissionsspektren bestimmter farbiger
Krebszellen in bestimmten Körpergeweben von denjenigen normaler Zellen unterschiedlich sind. Auch
hier können die Emissionsspektren zur Erkennung der abnormen Anwesenheit pathologischer Zellen dienen.
Bei einer bekannten Meßeinrichtung der eingangs genann.en Art (DE-OS 25 44 575) wird ein Laserstrahl
auf einen Aerosolstrom fokussiert, welcher fluoreszierende Partikel enthält. Die von den Partikeln ausgesandte
Streustrahlung wird über ein Linsensystem durch ein durchstimmbares akustooptisches Filter hindurchgeschbkt,
um anschließend von einem Fotovervielfacher in elektrische Signale umgesetzt zu werden. Das
durchstimmbare akustooptische Filter ist derart ausgebildet, daß seine Durchlaßfrequenz zeitabhängig sehr
schnell variiert Während ein Partikel sich im Brennpunkt des Laserstrahlenbündels befindet, durchläuft die
Durchlaßfrequenz des Filtersystems das gesamte zu messende Frequenzband. Die dabei von dem Fotovervielfacher
empfangene Strahlung soll in ihrem zeitlichen Verlauf den in der Streustrahlung enthaltenen Frequenzen
entsprechen. Bei diesem Prinzip des zeitlichen Auseinanderziehens des interessierenden Frequenzbandes
wird davon ausgegangen, daß das in dem Flüssigkeitsstrom enthaltene Partikel im Brennpunkt
des Laserstrahlenbündels stationär bleibt Tatsächlich bewegt sich das Partikel aber mit der Geschwindigkeit
des Flüssigkeitsstromes. Wenn das Strahlenbündel im Brennpunkt auf einen extrem kleinen Strahlquerschnitt
fokussiert ist, erfolgt eine Beeinflussung der Strahlung durch das Partikel nur so lange, wie das Partikel
benötigt, um den Brennpunkt zu durchlaufen. Die Zeitdauer, die für die Durchführung der Spektralanalyse
des Partikels zur Verfügung steht, ist also von der Partikelgröße abhängig. Andererseits variiert die von
dem Linsensystem aufgenommene Streulichtmenge mit dem Auftreffwinkel des Strahlenbündels auf die
Oberfläche des Partikels. Da für die einzelnen Wellenlängen die jeweilige Streulichtmenge ermittelt
wird und die Gesamtmenge des entstehenden Streulichts sich zeitlich verändert, ergeben sich keine
vergleichbaren Relationen zwischen den Meßwerten, die zu verschiedenen dicht aufeinanderfolgenden
Zeitpunkten an dem sich bewegenden Partikel ermittelt werden. Ferner läßt sich ein akustooptisches Filter,
dessen Durchlaßbereich sich zeitlich sehr schnell ändern muß, nur schwer realisieren.
Bekannt ist ferner eine Meßeinrichtung zur refraktometrischen
Bestimmung physikalischer Größen einer Substanz unter Zugrundelegung der Totalreflexion
(DE-OS 23 33 663), bei der Licht an einer Grenzfläche
zwischen einem Prisma und einer Substanz reflektiert wird und das auf einen Schirm auftretende reflektierte
Licht mit Fotoelementen abgetastet wird. Hierbei ist eine große Anzahl von Fotoelementen über den
gesamten Meßbereich in Form einer oder mehrerer Zeilen angeordnet Die Fotoelemente dienen zur
Bestimmung der Hell-Dunkel-Grenze.
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, eine Meßeinrichtung der eingangs genannten Art derart
, weiterzubilden, daß unter Verwendung eines einfacheren
Filters, άα zeitlich invariabel ist, eine Spektralanaly-
*» se, der sich mit dem Trägerstrom bewegenden Partikel
in kurzer Zeit möglich ist
"■ Zur Lösung dieser Aufgabe ist erfindungsgemäß
vorgesehen, daß ·
' a) das den Trägerstrom durchsetzende Strahlenbündel
eine in Richtung des Trägerstroms orientierte und eine Meßstrecke festlegende Breite aufweist,
b) das weitere Linsensystem die Meßstrecke auf der Filtereinrichtung in Form einer Abbildungsstrecke
abbildet und
c) die Filtereinrichtung in Richtung der Abbildungsstrecke ein von der Wellenlänge fortlaufend
abhängendes Durchlaßverhalten hat
Bei dem erfindungsgemäßen Meßsystem wird das
Strahlenbündel nicht auf den Trägerstrom fokussiert, sondern es trifft den Trägerstrom entlang einer
■ i Meßstrecke, zu deren Durchlaufen ein Partikel eine
f gewisse Zeit benötigt Diese Meßstrecke wird auf der
■ Filtereinrichtung ebenfalls als Strecke abgebildet ·.:· Während ein Partikel die Meßstrecke durchläuft
durchläuft das Bild des Partikels an der Filtereinrichtung
■ die Abbildungsstrecke. Die Filtereinrichtung ist so ausgebildet, daß sie in unterschiedlichen Bereichen
Strahlungen mit unterschiedlichen Wellenlängen durchläßt Auf diese Weise wird durch eine spezielle
Strahlführung und durch das räumlich unterschiedliche Durchlaßverhalten der Filtereinrichtung eine Zerlegung
der Strahlung in die verschiedenen Spektralbereiche bewirkt Ein wichtiger Vorteil besteht darin, daß das
Partikel unabhängig von seiner Position an allen Stellen der Meßstrecke von im wesentlichen der gleichen
Strahlungsmenge getroffen wird und demnach auch die gleiche Strahlungsmenge aussendet. Dies ermöglicht
eine quantitative Auswertung, der an verschiedenen Stellen der Meßstrecke ausgesandten Strahlungsenergien.
Der Meßvorgang erstreckt sich über die Zeit, die ein Partikel benötigt, um die Meßstrecke zu durchlaufen.
Dabei wird eine zeitlich invariante Filtereinrichtung benutzt die lediglich eine bestimmte räumliche Verteilung
ihrer Durchlaßbereiche haben muß.
;■ Vorteilhafte Ausgestaltungen und Weiterbildungen
der Erfindung sind den Unteransprüchen zu entnehmen.
Im folgenden wird ein Ausführungsbeispiel der
■ Erfindung unter Bezugnahme auf die Figuren näher erläutert. Es zeigt
F i g. 1 ein Blockschaltbild einer Meßeinrichtung,
Fig.2 ein X-Y Oszillogramm des Spektrums von W-Zellen,
Fig.3 eine graphische Darstellung zur Erläuterung
der zeitlichen Veränderung des Spektrums einer Zelle und der Möglichkeit zur Erzielung unterschiedlicher
Wellenlängen zu verschiedenen Zeitpunkten.
In Fig. 1 ist ein Flußerzeugungssystem 10dargestellt,
das eine Düse 12 aufweist, die einen Partikel enthaltenden Strom 14 liefert. Hierbei kann es sich
entweder um solche Partikel handein, die bei entsprechender Anregung fluoreszieren, oder um nicht
fluoreszierende Partikel, die mit fluoreszierenden Substanzen markiert sind. Ferner können die Partikel
tierische oder pflanzliche Zellenmaterie enthalten. Typibcherweise werden aus der Düse 12 500 bis
5000 Zellen pro Sekunde mit einem Zellenabstand von 0,2 bis 2 cm ausgegeben. Die Partikel kreuzen ein von
einer Strahlungsquelle 18 ausgesandtes Strahlenbündel
ίο aus Lichtstrahlen. Wie bei 20 angegeben ist, neigt die die
Partikel enthaltende Flüssigkeit dazu, nach dem Durchgang durch den Strahl in Tropfen zu zerfallen.
Der Querschnittsbereich des Strahlenbündels 16 ist bei 22 gestrichelt angedeutet Sein Durchmesser beträgt
etwa 1 mm. Als Strahlungsquelle 18 dient eine Laserquelle. Hierbei ist die Strahlungsquelle rechtwinklig
zu dem Flüssigkeitsstrom angeordnet.
Der von der Strahlungsquelle 18 ausgesandte Strahl wird durch eine linienförmig fokussierende Bündelungsvorrichtung
19 auf eine Linie konvergiert, die koaxial zu dem von den Zellen durchlaufenen Weg verläuft Diese
Linie erstreckt sich in F i g. 1 von A nach C. Durch die Verjüngung des Strahlenbündels wird seine Intensität
auf den von den Zellen durchlaufenen Weg beschränkt, so daß eine optimale Strahlausnutzung erfolgt
In F i g. 1 ist eine Zelle, die den Strahl durchquert, in
drei verschiedenen Positionen A, B und C dargestellt
Die Zelle wird beim Durchgang durch das Strahlenbündel fluoreszenzaktiviert. Ein weiteres Linsensystem 24
und eine Irisblende 26 projizieren das Bild einer jeden Zelle auf eine Filtereinrichtung 28 nach Art eines
Keilfilters 28. Das Bild der Zelle in Position A wird auf der Filtereinrichtung 28 auf die Stelle Λ'projiziert, das
Bild in Position B wird auf die Stelle B' und das Bild in
Position Cauf die Stelle C'projiziert Ein Verdunklungsstab 29 blockiert den Einfall aus einem bestimmten
Aussendebereich auf das Keilfilter. Zusätzlich oder anstelle des Verdunklungsstabes 29 kann zur Blockierung
des Einfalls ein Sperrfilter benutzt werden. Wie in
"0 F i g. 1 dargestellt ist, läßt das untere Ende der
Filtereinrichtung 28 Strahlen am ultravioletten Ende des Spektrums durch, das obere Ende läßt Wellenlängen im
Rotbereich durch, während die Stelle B' beispielsweise Wellenlängen im Blaubereich durchläßt. Obwohl das
gesamte Fluoreszenz-Emissionsspektrum auf die Stelle A' projiziert wird, wenn die Zelle in Stellung A ist, läßt
das Filter nur einen kurzwelligen Anteil des Spektrums (z. B. ultraviolett) durch. Bei B' wird ein langwelligerer
Anteil (z. B. blau) durchgelassen, während bei C der langwelligste Anteil des Spektrums (z. B. rot) von der
Filtereinrichtung durchgelassen wird.
Die von der Filtereinrichtung 28 ausgesandten Strahlen werden von einer Fokussiereinrichtung 30
sequentiell auf einen Fotovervielfacher 32 fokussiert Dies bedeutet, daß, wenn das Abbild der Zelle bei A' ist,
der kurzwelligere Anteil des Fluoreszenz-Emissionsspektrums auf den Fotovervielfacher fokussiert wird.
Wenn die Zelle das Strahlenbündel 16 durchquert, werden auf den Fotovervielfacher 32 nacheinander
immer langwelligere Anteile des Emissionsspektrums fokussiert, bis das Abbild der Zelle die Stelle C erreicht,
an der die längste interessierende Wellenlänge auf den Fotovervielfacher gerichtet wird. Das von dem Fotovervielfacher
32 ausgegebene Ausgangssignal wird einem Signalprozessor 34 und einem Aufzeichnungsgerät als
zeitvariantes Signal zugeführt. Seine Zeitachse ist der Wellenlänge proportional und die Ausgangsspannung
oder der AusRangsstrom ist der Emissionsintensität bei
einer bestimmten Wellenlänge proportional. Auf diese Weise kann das gesamte Fluoreszenz-Emissionsspektrum
von Partikeln, beispielsweise Zellen, abgetastet werden. Dies geschieht durch Projektion des bewegten
Bildes eines Partikels während dessen Durchlauf durch einen Erregerstrahl auf ein Keilfilter, welches dadurch
zunehmend langwelligere (kurzwelligere) Spektralanteile an eine Erkennungseinrichtung liefert, die die
Fokussiereinrichtung 30 und den Fotovervielfacher 32 enthält. Anstelle des Keilfilters kann als Filtereinrichtung
28 bei geeigneter Geometrie auch eine andere optische Dispersionseinrichtung verwendet werden, wie
beispielsweise ein Prisma oder ein Strichgitter. Ferner kann anstelle einer Linse als Fokussiereinrichtung 30
und anstelle des Fotovervielfachers 32 eine lineare lichtempfindliche Diodenanordnung in der Nähe der
Filtereinrichtung 28 angeordnet werden, wobei die unterste Diode dann beispielsweise auf den ultravioletten
Anteil des Spektrums und die höchste Diode beispielsweise auf den Rot-Anteil des Spektrums
reagieren würde. In diesem Fall würden die Ausgangssignale der Dioden sequentiell auftreten, jedoch wurden
sie parallel anstehen und sich daher für die Verarbeitung in einer entsprechenden Schaltung besonders eignen.
Obwohl das Keilfilter als Filtereinrichtung 28 mit seinem Rotbereich am oberen Ende und dem Ultraviolettbereich
am unteren Ende dargestellt ist, können diese Enden natürlich auch vertauscht werden, so daß
rot am unteren Ende und ultraviolett am oberen Ende auftritt. Das auf die oben geschilderte Weise erzeugte
Spektrum ist ein sogenanntes unkorrigiertes Spektrum. Es kann korrigiert werden, indem die Übertragungsfunktion
des Systems entweder elektronisch oder unter Verwendung von Raumfiltern in bekannter Weise
korrigiert wird.
Das Ausgangssignal des Fotovervielfachers 32 wird einem Signalprozessor 34 zugeführt, der von dem
Ausgangssignal eines Streulichtdetektors 38 angesteuert wird. Der Streulichtdetektor 38 reagiert auf das
von jeder Zelle bei Erreichen der Position A ausgesandte Streulicht. Vor Erreichen der Position A
fluoresziert die Zelle noch nicht Bei Erreichen der Position A wird die Fluoreszenz von dem Laserstrahl
aktiviert und zusätzlich zu den durch das Linsensystem 24 und die Irisblende 26 projizierten Strahlen fallen
weitere Strahlen auf den Streulichtdetektor 38. Der Streulichtdetektor 38 enthält ein fotoempfindliches
Element. Der Streulichtdetektor 38 liefert Signale an den Signalprozessor 34 und zeigt die Anwesenheit eines
Partikels im Strahlenbündel 16 an. Das Ausgangssignal des Fotovervielfachers 32 kann ferner einem Aufzeichnungsgerät
39, beispielsweise einem Oszillographen, zugeführt werden, wo das Fluoreszenzspektrum optisch
beobachtet und erforderlichenfalls fotografiert werden kann. Beispielsweise kann ein -Y-V-Oszillograph verwandt
werden, um jeden Impuls (oder jede Zelle) gemäß F i g. 2 isometrisch anzuzeigen.
Der Signalprozessor 34 liefert aus den Eingangssignalen die interessierenden Informationen. Er erlaubt die
Analyse der gesamten Ausgangswellenform des Fotovervielfachers 32 und eine Computeranalyse der
gesamten Zellenmenge. Die Ausgangswellenform wird einem Übergangs-Wellenformdetektor 42 über einen
Verstärker 40 zugeführt und anschließend in einen Computer 44 eingegeben. Die Wellenlängenänderung
im Spektrum erhält man an verschiedenen Stellen der Zeitachse gemäß Fi g. 3. Jeder Zeitpunkt t, entspricht
einer bestimmten Fluoreszenz-Wellenlänge und der Wert von η wird von der Gesamtauflösung der zur
Markierung benutzten chemischen, der optischen und der elektronischen Parameter bestimmt.
Es ist möglich, die Zeilentypen entsprechend den Fluoresenzwerten bei einer bestimmten Wellenlänge
oder durch Verwendung der beschreibenden Parameter physikalisch zu isolieren. Da das Eingruppieren der
Zellen von der Identifizierung abhängt, reicht es aus, lediglich eine geeignete Analysiereinrichtung zu finden
und die Zellen mit einer Sortierlogik 46 auf der Grundlage dieser Analyse zu sortieren. Dies kann mit
einem Zellensortierer geschehen. Dabei muß Wert auf die Eindeutigkeit der beschreibenden Parameter und die
zur Durchführung des Sortiervorganges verfügbaren Zeit gelegt werden.
Hierzu 2 Blatt Zeichnungen
Claims (1)
1. Meßeinrichtung zur Ermittlung des Fluoreszenz-Emissionsspektrums
von in einem fließenden Trägerstrom enthaltenen Partikeln, mit einer ein
Strahlenbündel durch den Trägerstrom hindurchschickenden Strahlungsquelle, einem im Strahlungsweg vor dem Trägerstrom befindlichen Linsensystem,
welches das Strahlenbündel auf den Trägerstrom leitet, und einem hinter dem Trägerstrom
angeordneten weiteren linsensystem, welches die
Strahlen auf eine Filtereinrichtung mit variierender Wellenlängendurchlässigkeit leitet, und mit mindestens
einem hinter dieser Filtereinrichtung angeordneten Strahlungsempfänger, dadurch gekennzeichnet,
daß
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|---|---|---|---|
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Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE2929170A1 DE2929170A1 (de) | 1980-06-12 |
| DE2929170C2 true DE2929170C2 (de) | 1984-02-09 |
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|---|---|
| US (1) | US4172227A (de) |
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| FR (1) | FR2431696A1 (de) |
| GB (1) | GB2032097B (de) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE102008029700A1 (de) * | 2008-06-24 | 2010-01-14 | Palas Gmbh Partikel- Und Lasermesstechnik | Verfahren zum Bestimmen des Eindringens von Prüfpartikeln in einen Messbereich |
Families Citing this family (44)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS53135660A (en) * | 1977-04-30 | 1978-11-27 | Olympus Optical Co Ltd | Fluorescent photometric microscope using laser light |
| US4284355A (en) * | 1979-10-29 | 1981-08-18 | Ortho Diagnostics, Inc. | Automated method for cell volume determination |
| FR2500164A1 (fr) * | 1981-02-13 | 1982-08-20 | Fella Christian | Procede de mise en evidence des antigenes de groupe sanguin a, b, h sur des cellules humaines en milieu liquide |
| US4624915A (en) * | 1982-07-29 | 1986-11-25 | Board Of Trustees Of Michigan State University | Positive selection sorting of cells |
| US4629687A (en) * | 1982-07-29 | 1986-12-16 | Board Of Trustees Of Michigan State University | Positive selection sorting of cells |
| US4492752A (en) * | 1982-09-03 | 1985-01-08 | Ortho Diagnostics Systems Inc. | Method for discriminating between unstained and absorbing dye stained cells |
| US4837446A (en) * | 1988-03-31 | 1989-06-06 | International Paper Company | Apparatus and process for testing uniformity of pulp |
| JP3181609B2 (ja) * | 1990-12-28 | 2001-07-03 | 株式会社島津製作所 | キャピラリークロマトグラフィー用光検出器 |
| US5203339A (en) * | 1991-06-28 | 1993-04-20 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Health And Human Services | Method and apparatus for imaging a physical parameter in turbid media using diffuse waves |
| US5484571A (en) * | 1991-10-08 | 1996-01-16 | Beckman Instruments, Inc. | Enhanced fluorescence detection of samples in capillary column |
| DK0660936T3 (da) | 1992-09-14 | 1999-05-25 | Stanford Res Inst Int | Op-konverterende reportermolekyle til biologiske og andre assays under anvendelse af laserexcitationsteknik |
| CA2114371C (en) * | 1993-01-28 | 2007-10-09 | Kenji Kamada | Method of spectrometry and apparatus therefor |
| US5528045A (en) * | 1995-04-06 | 1996-06-18 | Becton Dickinson And Company | Particle analyzer with spatially split wavelength filter |
| AU7831798A (en) | 1997-06-09 | 1998-12-30 | Guava Technologies, Inc. | Method and apparatus for detecting microparticles in fluid samples |
| US6710871B1 (en) | 1997-06-09 | 2004-03-23 | Guava Technologies, Inc. | Method and apparatus for detecting microparticles in fluid samples |
| US6372895B1 (en) | 2000-07-07 | 2002-04-16 | 3M Innovative Properties Company | Fluorogenic compounds |
| US6544396B1 (en) * | 2000-07-20 | 2003-04-08 | Symyx Technologies, Inc. | Multiplexed capillary electrophoresis system |
| US6531041B1 (en) | 2000-07-20 | 2003-03-11 | Symyx Technologies, Inc. | Multiplexed capillary electrophoresis system with rotatable photodetector |
| US6572750B1 (en) * | 2000-07-21 | 2003-06-03 | Symyx Technologies, Inc. | Hydrodynamic injector |
| US6462816B1 (en) | 2000-07-21 | 2002-10-08 | Symyx Technologies, Inc. | Parallel capillary electrophoresis system having signal averaging and noise cancellation |
| US20030124592A1 (en) * | 2001-10-24 | 2003-07-03 | Bioprofile, Llc | Methods for detecting genetic haplotypes by interaction with probes |
| US20090088982A1 (en) * | 2003-07-31 | 2009-04-02 | Fukushima Noelle H | Co-detection of single polypeptide and polynucleotide molecules |
| US20080021674A1 (en) * | 2003-09-30 | 2008-01-24 | Robert Puskas | Methods for Enhancing the Analysis of Particle Detection |
| US7468796B2 (en) * | 2004-08-06 | 2008-12-23 | Compucyte Corporation | Multiple-color monochromatic light absorption and quantification of light absorption in a stained sample |
| US8685711B2 (en) | 2004-09-28 | 2014-04-01 | Singulex, Inc. | Methods and compositions for highly sensitive detection of molecules |
| EP1805500A4 (de) * | 2004-09-28 | 2008-05-07 | Singulex Inc | System und verfahren zur spektroskopischen analyse einzelner partikel |
| US7572640B2 (en) * | 2004-09-28 | 2009-08-11 | Singulex, Inc. | Method for highly sensitive detection of single protein molecules labeled with fluorescent moieties |
| US9040305B2 (en) * | 2004-09-28 | 2015-05-26 | Singulex, Inc. | Method of analysis for determining a specific protein in blood samples using fluorescence spectrometry |
| EP1859239B1 (de) * | 2005-02-08 | 2017-09-06 | Northrop Grumman Systems Corporation | System und verfahren zur verwendung bei der entdeckung gefährlicher aerosol-teilchen |
| EP3168618B1 (de) | 2006-04-04 | 2018-11-21 | Singulex, Inc. | Hochempfindliche verfahren zur troponinanalyse |
| US7838250B1 (en) | 2006-04-04 | 2010-11-23 | Singulex, Inc. | Highly sensitive system and methods for analysis of troponin |
| JP5315574B2 (ja) * | 2007-03-22 | 2013-10-16 | 富士フイルム株式会社 | 撮像装置 |
| US7914734B2 (en) | 2007-12-19 | 2011-03-29 | Singulex, Inc. | Scanning analyzer for single molecule detection and methods of use |
| CA2716522A1 (en) * | 2008-03-05 | 2009-10-15 | Singulex, Inc. | Methods and compositions for highly sensitive detection of molecules |
| GB2464183A (en) * | 2008-09-19 | 2010-04-14 | Singulex Inc | Sandwich assay |
| JP5678045B2 (ja) | 2009-06-08 | 2015-02-25 | シンギュレックス・インコーポレイテッド | 高感度バイオマーカーパネル |
| WO2011140484A1 (en) | 2010-05-06 | 2011-11-10 | Singulex, Inc | Methods for diagnosing, staging, predicting risk for developing and identifying treatment responders for rheumatoid arthritis |
| WO2013181362A1 (en) * | 2012-06-01 | 2013-12-05 | Advanced Analytical Technologies, Inc. | Multi-color detection system for multiplexed capillary electrophoresis |
| US9207066B2 (en) | 2014-02-14 | 2015-12-08 | Palo Alto Research Center Incorporated | Spatial modulation of light to determine dimensional characteristics of objects in a flow path |
| US9952033B2 (en) | 2014-02-14 | 2018-04-24 | Palo Alto Research Center Incorporated | Spatial modulation of light to determine object length |
| US9528925B2 (en) | 2014-02-14 | 2016-12-27 | Palo Alto Research Center Incorporated | Spatial modulation of light to determine object position |
| US10451482B2 (en) | 2014-02-14 | 2019-10-22 | Palo Alto Research Center Incorporated | Determination of color characteristics of objects using spatially modulated light |
| US9400174B2 (en) * | 2014-04-07 | 2016-07-26 | Palo Alto Research Center Incorporated | Monitor for particle injector |
| ES2684868B1 (es) * | 2017-03-31 | 2019-07-16 | Univ Burgos | Dispositivo para determinacion fluorimetrica de aminas terciarias |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3470373A (en) * | 1966-10-18 | 1969-09-30 | Litton Systems Inc | Method for analysis and identification of biologic entities by phosphorescence |
| US3497690A (en) * | 1967-09-21 | 1970-02-24 | Bausch & Lomb | Method and apparatus for classifying biological cells by measuring the size and fluorescent response thereof |
| US3586859A (en) * | 1970-02-16 | 1971-06-22 | Irwin J Katz | Fluorescent cell viability counter |
| US3864571A (en) * | 1971-02-10 | 1975-02-04 | Wheeler International Inc | Method and Apparatus for Automatically, Identifying and Counting Various Cells in Body Fluids |
| US3918812A (en) * | 1973-05-07 | 1975-11-11 | Us Energy | Diagnoses of disease states by fluorescent measurements utilizing scanning laser beams |
| US3885879A (en) * | 1973-06-25 | 1975-05-27 | Fisher Scientific Co | Dual beam spectrophotometer utilizing a spectral wedge and bifurcated fiber optic bundle |
| DE2333663A1 (de) * | 1973-07-02 | 1975-01-30 | Okstajner Tomislav Dipl Ing | Messeinrichtung zur refraktometrischen bestimmung physikalischer groessen einer substanz |
| US3916197A (en) * | 1973-11-28 | 1975-10-28 | Particle Technology Inc | Method and apparatus for classifying biological cells |
| US3973129A (en) * | 1975-01-10 | 1976-08-03 | Bell Telephone Laboratories, Incorporated | Fluorimetric apparatus and method for analysis of body fluid |
| DE2544575A1 (de) * | 1975-10-04 | 1977-04-07 | Fraunhofer Ges Forschung | Verfahren zur identifizierung und groessenbestimmung einzelner fluessigkeits- oder gasgetragener partikel |
-
1978
- 1978-07-21 US US05/926,759 patent/US4172227A/en not_active Expired - Lifetime
-
1979
- 1979-07-19 DE DE2929170A patent/DE2929170C2/de not_active Expired
- 1979-07-20 FR FR7918793A patent/FR2431696A1/fr active Granted
- 1979-07-23 GB GB7925633A patent/GB2032097B/en not_active Expired
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE102008029700A1 (de) * | 2008-06-24 | 2010-01-14 | Palas Gmbh Partikel- Und Lasermesstechnik | Verfahren zum Bestimmen des Eindringens von Prüfpartikeln in einen Messbereich |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US4172227A (en) | 1979-10-23 |
| FR2431696A1 (fr) | 1980-02-15 |
| GB2032097A (en) | 1980-04-30 |
| GB2032097B (en) | 1982-10-13 |
| DE2929170A1 (de) | 1980-06-12 |
| FR2431696B3 (de) | 1981-05-29 |
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