DE2857625A1 - Probenzelle - Google Patents
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Description
10466A/Dr.v.B/Vu
AKRO-MEDIC ENGINEERING, INC. 30 Broad Street, Denville, N.J. 07006 (V.St.A.)
Die vorliegende Erfindung betrifft eine Probenzelle gemäß dem Oberbegriff
des Anspruchs 1.
Insbesondere betrifft die Erfindung die qualitative und quantitative
Analyse von immunologischen Reaktionen, wobei elektro-optische Verfahren für die Qualifizierung des Grades der Agglutination Verwendung finden
können, der in einem immunologischen Reaktionssystem vorliegt, und die Konzentration von immunoreaktiven Komponenten, die im System die Agglutination verursachen, bestimmt werden können.
Die Analyse von Arzneimitteln, Drogen und anderer Bestandteile biologischer Fluide hat in den letzten Jahren zunehmend an Interesse gewonnen
und die therapeutische überwachung von Arzneimitteln hat beträchtliche klinische Bedeutung erlangt und die Entwicklung neuer Analyseverfahren und -geräte angeregt. Es ist seit kurzem bekannt, zur Bestimmung
von Substanzen in verschiedenen biologischen Fluiden Analysesysteme zu ver-
030035/0010
wenden, die mit Antigenen, Haptenen oder Antikörpern, die mit einem Enzym
markiert sind, arbeiten, siehe z.B. die Arbeit von G. Brian Wisdom, "Enzyme-Immunoassay",
Clinical Chemistry, Band 22, 8 (1976), S.1243-55. Diese Analysesysteme
werden abgekürzt als "EIA" (enzyme immunoassay = Enzym-Immunoanalyse)
und "ELISA" (enzyme-linked immunoassay = enzymgekoppelte Immunoanalyse)
bezeichnet. Es gibt ferner die Radio-Immunoanalyse (RIA), bei der Hapten-Protein-Konjugate erzeugt und bestimmte Plätze des Arzneimittel moIeküls
radiaktiv markiert werden, siehe die Arbeit von Alan Broughton und James E. Strong "Radioimmunoassay of Antibiotics and Chemotherapeutic Agents"
Clinical Chemistry, Band 22, No.6 (1976) S.726-32 und R. Cleeland u.a."Detection
of Drugs of Abuse by Radio Immunoassay: A Summary of Published Data and Some New Information", Clinical Chemistry, Band 22, No.6 (1976) S.713-25.
Vor der Entwicklung der verschiedenen neueren Analyseverfahren
wurde das Vorhandensein von Antigen/Antikörper-Komplexen im allgemeinen visuell
mit dem unbewaffneten Auge festgestellt. Mit dem unbewaffneten Auge kann man jedoch Grenzfälle von Reaktionen, die noch klinisch bedeutungsvoll
sein können, nicht feststellen oder unterscheiden und die Egebnisse hatten daher oft nur begrenzte klinische Bedeutung. Selbst mikroskopische Untersuchungen
lieferten nur begrenzt klinische Information, da keine quantitativen Ergebnisse erhalten werden konnten.
Bei der EIA stehen zwar im allgemeinen spezifische und hochempfindliche
Verfahren zur Identifizierung und Quantifizierung oder quantitativen Bestimmung einer Vielzahl von Substanzen zur Verfügung, aber auch
diese Methode leided an verschiedenen Nachteilen und Einschränkungen. Es
ist im allgemeinen weniger empfindlich als RIA und anfälliger gegen Störeinflüsse.
Außerdem ist die Bestimmung des Endpunktes (der Anfangsgeschwindigkeit der enzymatischen Reaktion) schwieriger festzustellen als bei RIA-Verfahren
und außerdem erfordern alle EIA-Verfahren mit der Ausnahme des homogenen EIA-Verfahrens, eine Trennung der gebundenen Moleküle von den
freien markierten Molekülen. Im allgemeinen steht dabei jedoch nur eine begrenzte
Anzahl von verwendbaren Trennverfahren zur Verfugung. Die RIA-Verfahren
erfordern andererseits die Herstellung eines spezifischen Antikör-
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pers und die Entwicklung einer geeigneten radioaktiv markierten Verbindung.
Die Anwendung dieser Verfahren erfordert außerdem äußerste Sorgfalt und Fachkenntnisse
wegen der Gefahr von Strahlungsschäden und die Strahlung kann sogar die immunchemische Reaktionsfähigkeit der markierten 'substanz beeinträchtigen.
Zu den bekannten Analysesystemen gehört ferner die Spinn Immunoanalyse,
bei der bekannte Mengen von Antikörpern zu dem zu bestimmenden Arzneimittel mit einem Analogon des Arzneimittels, das mit einer Ndtroxid-Markierung
(Spinn-Markierung) markiert worden ist, gemischt wird und die Probe des biologischen Fluids dann dieser Mischung zugesetzt wird. Die
Arzneimittel konzentration in der Probe wird dann durch Elektronenspinnmessung
bestimmt, siehe die Arbeit von Simon L. Sharpe "Quantitative Enzyme Immunoassay:
Current Status", Clinical Chemistry , Bd. 22, No. 6 (1976) s.733-38.
Bei wieder einem anderen bekannten Analyseverfahren werden die Antikörper an fluoreszierende Verbindungen angelagert, die bei Anregung
durch Bestrahlung mit einer bestimmten Wellenlänge Licht emittieren. Es ist ferner bekannt, opake, kolloidale Teilchen, wie Latexkügelchen, Glas- und
Keramikkügelchen, Kaolin-, Kohlenstoff- und Holz- oder Aktivkohleteilchen
sowie Tierblut-Bestandteile, typischerweise Erytrocyten, zu verwenden und
das Antigen/Antikörper hieran anzulagern.
Bei den oben erwähnten immunologischen Analyseverfahren verbindet sich die markierte Komponente einer Antigen/Antikörper-Reaktion mit
der zugehörigen komplementären Stelle und der gebundene Betrag hängt von
der Konzentration der anderen Komponente ab; wenn eine dieser Konzentrationen geändert wird, tritt eine entsprechende Änderung in der Verteilung der
markierten Komponente zwischen der gebundenen und der ungebundenen Fraktion ein. Die Eigenschaften der Indikatoren bestimmen ihre Verteilung und man
kann eine Eichkurve herstellen, aus der der Zusammenhang der Konzentration der veränderlichen (unmarkierten) Komponente zu der der markierten Komponente
dargestellt wird. Derzeit geschieht dies dadurch, "daß man entweder die
gebundene oder die ungebundene Fraktion durch feste-Phase-Absorption im Reagenzglas oder Kunststoffbett, durch Zentrifugieren, wiederholtes Neusus-
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pendieren und Waschen entfernt. Mit diesen Verfahren läßt sich zwar eine
Kurve herstellen, die den Zusammenhang zwischen der gebundenen und der ungebundenen
Fraktion darstellt, sie sind jedoch zeitraubend, mühsam und erfordern
komplizierte Geräte. Die EIA- RIA- und Spinn-Immunoanalyseverfahren erfordern
außerdem gewöhnlich die Einführung von Indikatoren in das Reaktionssystem, die zwar nicht immunologisch reagieren aber die Immunreaktivität des
Systems durch die chemische Aktivität oder Radioaktivität, aufgrund derer sie als Indikatoren verwendet werden können, unter Umständen beeinträchtigen.
Die klassischen visuellen Indikatoren für die Immunreaktivität sind frei von diesen Nachteilen des EIA-, RIA- und Spinn-Immunanalyseverfahrens,
da keine Phasentrennung und Entfernung von Bestandteilen aus dem
immunreaktiven System erforderlich sind und keine Indikatoren eingeführt zu
werden brauchen, die die Immunreaktivität des betreffenden Systems stören oder ändern können. Sie basieren vielmehr auf einer Umverteilung von opaken
Teilchen beim übergang von einem gleichförmigen, nicht agglutinierten Zustand
in einem agglutinierten Zustand. Da jedes Teilchen als Indikator für zahlreiche immunrekationsfähige Proteinmoleküle dient, wird eine Anzahl von
markierten Teilchen unter Bildung einer charakteristischen mikroskopischen Agglutinationstextur agglutiniert, welche durch visuelle Betrachtung qualitativ
ausgewertet werden kann. Dieses Verfahren läßt sich jedoch nicht ohne
weiteres für quantitative Messungen verwenden und ist daher ebenfalls von recht begrenzter klinischer Bedeutung.
In der Patentliteratur sind ebenfalls bereits zahlreiche verschiedene
Verfahren und Einrichtungen zur Auswertung von Agglutinationsreaktionen beschrieben. So ist z.B. aus der US-PS 3 074 853 (Brewer) ein
Verfahren und eine Einrichtung zur Durchführung von immunologischen Reaktionen
bekannt, bei denen eine Mischung eines feinverteilten Feststoffes
und zweier auf Antigen/Antikörper-Reaktionen zu prüfenden Flüssigkeiten in
einem Probefleck auf einer opaken Oberfläche, deren Farbe einen hohen Kontrast bezüglich der Farbe des Feststoffs ergibt, gebildet und verteilt wird.
Der Probefleck wird dann visuell untersucht.
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Aus der US-PS 3 520 609 (Lion) ist ein Verfahren zur Auswertung
von Agglutinationsreaktionen bekannt, bei dem die Proben mittels eines Energiestrahles,
z.B. eines Licht- oder Elektronenstrahls, abgetastet werden.
Bei einer erheblichen Agglutination treten ausgeprägte Grenzen zwischen den agglutinierten Zellen und den umgebenden Bereichen in der abgetasteten Zone
auf und durch diese Unterschiede wird der Abtaststrahl moduliert, während er sie abtastet, so daß eine entsprechende Änderung in der Frequenz des dabei
erzeugten Signales auftrttt. Ein zweites Signal wird aus der finderungsgeschwindigkeit
des durch den Abtaststrahl erzeugten Signales erzeugt und über eine vorgegebene Zeitspanne integriert; der Integralwert wird dann mit
einem bestimmten Standard verglichen, der einer wesentlichen Agglutination
entspricht, um festzustellen, ob eine solche Agglutination im Reaktionsbereich stattgefunden hat.
Aus der US-PS 3 819 271 (Beug) sind ein Verfahren und eine Einrichtung
zur Messung einer Zellenagglutination in einer Trägerflüssigkeit bekannt. Bei diesem bekannten Verfahren wird die Trägerflüssigkeit, in der
Zellen suspendiert sind, in einen Behälter eingeschlossen, der längs eines
kreisförmigen Weges bewegt wird, und man läßt einen Lichtstrahl durch die Suspension fallen. Der Grad der Agglutination der Zellen wird aufgrund des
Betrages des Lichtes bestimmt, das beim Durchlaufen der Suspension gestreut wird.
Aus der US-PS 3 984 544 (Uzgiris) ist ein elektrophoretisches
Verfahren zur Bestimmung von Antigen(Antikörperreaktionen)bekannt und aus
der US-PS 3 990 851 (Gross u.a.) ist ein Verfahren und eine Einrichtung bekannt,
bei dem Antigen/Anikörperreaktionen dadurch meßtechnisch erfaßt werden, daß man ein Laserlichtbündel durch die Reaktionsmischung fallen läßt
und das vorwärtsgestreute Licht mißt.
Aus der US-PS 3 905 767 (Morris u.a.) ist ein Verfahren zur qualitativen oder quantitativen Messung von Antigen oder Antikörpern mit
einer Antigen/Antikörper-Reaktion bekannt, bei der ein Niederschlag gebildet
wird. Auch bei diesem bekannten Verfahren läßt man ein Lichtbündel durch
den Niederschlag fallen und mißt den Betrag des durch diesen gestreuten Lichtes
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Die in den oben erwähnten Patentschriften und anderen Patentschriften
zum Stand der Technik beschriebenen Verfahren und Einrichtungen arbeiten alle mit einer photometrischen Bestimmung der Agglutinationsreaktion,
wie mit einer Lichtstreuungsmessung,, Trübemessung oder Extinktionsmessung.
Bei allen diesen Messungen können daher in klinischer Hinsicht wesentliche Fehler durch die Farbe oder naturgegebene Wolkigkeit des untersuchten
biologixhen Fluids auftreten. Die in den oben erwähnten Patentschriften
beschriebenen Verfahren haben, mit Ausnahme des von Beug angegebenen Verfahrens, außerdem den Nachteil, daß eine ungleichmäßige Verteilung
der Reaktionsindikatoren bei einer automatischen Auswertung zu statistischen
Fehlern und bei einer manuellen Auswertung Schwierigkeiten hinsichtlich der Interpretation- auftreten.
Es besteht also schon seit langem ein Bedarf nach einem Analyseverfahren
zur Feststellung und quantitativen Erfassung von immunologischen Reaktionen, das einfacher ist als die bekannten Verfahren und schneller
durchgeführt werden kann als diese, und das klinisch signifikantere Information liefert, ohne daß es den Schwierigkeiten und Beschränkungen unterworfen
ist» die den derzeit zur Verfugung stehenden Immunanalyseverfahren von Natur
aus anhaften oder praktisch nicht zu vermeiden sind.
Durch die vorliegende Erfindung sollen also ein Immunanalyseverfahren
und eine Einrichtung zur Durchführung eines solchen Verfahrens angegeben werden, das sich für die Wahrnehmung und Quantifizierung von immunologischen
Reaktionen eignet.
Ferner soll durch die Erfindung ein Immunanalyseverfahren angegeben
werden, das klinisch signifikantere Information liefert als die derzeit verfügbaren Immunanalysetechniken und -systeme.
Weiterhin besteht efn Ziel der Erfindung darin, ein Immunanalysesystem
und ein Verfahren anzugeben, bei dem die Wahrnehmung und Quantifizierung von immunologischen Reaktionen schneller und genauer ausgeführt
werden kann als bei den bekannten System und Verfahren.
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Weiterhin ist es Ziel der Erfindung, ein Immunanalyseverfahren
anzugeben, das ungefährlich ist und das keine Trennung einer gebundenen Fraktion von einer ungebundenen Fraktion erfordert.
Durch die Erfindung sollen ferner eine Immunoanalysetechnik und
ein Immunoanalysesystem angegeben werden, mit dem ein größerer Teil der von
den markierten Komponenten verfügbaren Information gewonnen werden kann.
Durch die Erfindung soll weiterhin eine ebene Einmal-Reaktions-Abbildungszelle
einzigartiger Konstruktion zur Durchführung von immunologischen Reaktionen angegeben werden. Weiterhin soll durch die Erfindung ein
Halter angegeben werden, durch den die Reaktionsabbildungszellen in einer erfindungsgemäßen
Einrichtung während der Analyse der Reaktionspartner in der Zelle gehaltert bzw. befestigt werden können.
Diese Aufgaben werden erfindungsgemäß durch das im Patentanspruch
1 gekennzeichnete Verfahren und die in den Unteransprüchen angegebenen Weiterbildungen
dieses Verfahrens und Einrichtungen zur Durchführung solcher und ähnlicher Verfahren gelöst.
Durch das Verfahren und die Einrichtungen gemäß der Erfindung wird eine wesentliche Vereinfachung, Erhöhung der Meßgenauigkeit und Verkürzung
der Analysedauer sowie weitere Vorteile, die aus der folgenden Beschreibung ersichtlich werden, erreicht.
Im folgenden werden Ausführungsbeispiele der Erfindung unter
Bezugnahme auf die Zeichnung näher erläutert, in der gleiche bzw. gleichartige Teile mit gleichen Bezugszeichen bezeichnet sind.
Es zeigen:
Fig. 1 eine perspektivische Ansicht einer Reaktionszelle, die
bei der Durchführung des Verfahrens gemäß der Erfindung verwendet werden kann und einen wesentlichen Teil einer Einrichtung gemäß einer Ausführungsform der Erfindung darstellt;
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-ίο- 285762?'
Fig. 2 eine Schnittansicht in einer Ebene 2-2 der Fig. 1;
Fig. 3 eine perspektivische Ansicht einer AusfUhrungsform eines
erfindungsgemäßen Magazins für Probenzellen gemäß Fig. 1 und 2;
Fig. 4 ein Schnitt in einer Ebene 4-4 der Fig. 3; Fig. 5 ein Schnitt in einer Ebene 5-5 der Fig. 4;
Fig. 6a bis 6d scheniatische Frontansichten, die die jeweiligen
Stellungen einer Reaktionszelle in jeder Abbildungs- oder Probenzelle während
einer eine wirkungsvolle Mischung und gleichmäßige Verteilung der Reaktionspartner
gewährleistenden Rotation um eine Mittelachse darstellen;
Fig. 7 eine Schnittansicht in einer Ebene 7-7 der Fig. 6a, in der ein toroidförmiger Meniskus dargestellt ist, der sich in der Einfüllöffnung
der Reaktionszelle bildet, während diese rotiert;
Fig. 8 eine vereinfachte Seitenansicht der wesentlichen Teile einer Einrichtung gemäß der Erfindung, die für die vertikale Verschiebung
der einzelnen Probenzellen und die seitliche Verschiebung der Magazinanordnung bei der Durchführung des Verfahrens gemäß der Erfindung erforderlich
sind;
Fig. 9 eine Schnittansicht in einer Ebene 9-9 der Fig. 8;
Fig. 10 und 11 schematische Darstellungen eines Abbildungsvorganges, bei dem Bilder von agglutinierten Indikatorteilchen in einer
in einer Probenzelle enthaltenen Fluidsuspension auf einem Bildsensor erzeugt
werden;
Fig. 12 eine Vorderansicht eines Bildsensors, auf dem Bilder von agglutinierten Teilchen erzeugt werden;
Fig. 13 eine graphische Darstellung von elektronischen Signalen,
die Agglutinationsbereichen auf dem Bildsensor entsprechen und
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-U-
Fig. t4 ein Blockschaltbild einer elektro-optisehen Einrichtung»
wie sie zur Durchführung des Verfahrens gemäß der Erfindung mit Vorteil verwendet werden kann.
Durch die Erfindung werden ein neuartiges Verfahren und neuartige Einrichtungen für die Wahrnehmung und quantitative Erfassung vor» einer
Immunreaktion fähigen Komponenten von Immunreaktionssystemen angegeben. Bei
einer «usführimgsform der Einrichtung gemäß der Erfindung wird eine Magazinanordnung verwendet» die durch Seitenplatten oder -Wände sowie eine Vorder-
und Rückwand begrenzt ist und mehrere axial beabstandete Fächer zwischen den
Seitenwänrfea aufweist. In die Fächer kann jeweils eine Abhildungs- oder Probenzelle neuartiger Konstruktion eingesetzt und gehaltert werden. Jede Probenzelle wird aus zwei gegenüberliegenden parallelen ebenen Flächen gebildet, die jeweils eine im wesentlichen kreisförmige Vertiefung oder Nut aufweisen, so daß, wenn die Oberflächen unter Bildung einer einheitlichen Struktur miteinander verbunden sind» die kreisförmigen Vertiefungen eine Reaktionskammer bilden. Eine der kreisförmigen Vertiefungen ist mit einer Einfüllöffnung versehen, durch die eine Fluidprobe, z.B. eine biologische Flüssigkeit, und ein Reagens in die Reaktionskammer eingeführt werden können.
Die Einrichtung kann ferner mit einer Vorrichtung versehen sein,
wie einer Zange oder einem Finger, die in die Fächer einführbar ist, um die
Probenzellen anzuheben und in einen optischen Strahlengang eines von einer
monochromatischen Strahlungsquelle ausgehenden Strahlungsbündels» insbesondere Lichtbündels, zu bringen und die durch die Reaktionskammer gefallene
Strahlung wird durch eine Abbildungsoptik auf die Oberfläche eines Bildsensors fokussiert, der z.B. eine ladungsgekoppelte Einrichtung enthalten
kann.
Bei einer Ausführungsform des Verfahrens gemäß der Erfindung wird z.B. mittels Pipetten eine biologische Fluidtestprobe und ein Reagens
(insbesondere im wesentlichen opake, vorzugsweise kolloidale Teilchen, wie Latexkügelchen) durch die Einfüll öffnung in die Reaktionskammer gebracht,
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die Mischung gleichmäßig gemischt und zur Bildung agglutinierter Teilchen
inkubiert wird und der Inhalt der Reaktionskammer mit der Strahlung durchleuchtet
wird. Die durchfallende Strahlung wird auf eine Bildempfangsfläche
des Bildsensors abgebildet, auf der dunkle Flächenbereiche entstehen, die
den agglutinierten Teilchen in der Reaktionskammer entsprechen. Die Gesamtfläche
der dunklen Bereiche wird dann, vorzugsweise auf elektronischem Wege, gemessen.
Diese Prozedur wird dann mit mindestens einer Testprobe bekannter Antikörperkonzentration wiederholt und die Fläche der resultierenden
dunklen Flächenbereiche wird als Funktion der jeweiligen Konzentrationen aufgetragen. Die Konzentration aer immunreaktiven Komponente der unbekannten
Probe kann dann anhand des mit den Testproben erhaltenen Diagramms ermittelt
werden.
Ins Einzelne gehende Beschreibung eines Ausführungsbeispiels
Durch die Erfindung werden neue und einzigartige Verfahren und Einrichtungen zur Durchführung von immunologischen Reaktionen und für qualitative
und quantitative Bestimmungen von immunreaktionsfähigen Komponenten von Reaktionssystemen geschaffen. Bei dem Verfahren gemäß der Erfindung finden
elektro-optische Bildtechniken auf einen restfreien Anteil des Immunreaktionssystems
Anwendung und optische Bilder, die auf einem Bildsensor erzeugt werden, können kartographisch analysiert oder ausgewertet werden. Dadurch
läßt sich also der Grad der Agglutination in dem immunologischen Reaktionsmedium
quantitativ bestimmen und mit den Konzentrationen von immunreaktionsfähigen Komponenten (wie Antigenen und Antikörpern)» die die Agglutination
verursachen, in Beziehung setzen.
In Fig. 1 ist eine Abbildungs- oder Probenzelle 1 zur Durchführung
der immunologischen Reaktionen dargestellt, die einzigartig und speziell für die Verwendung in dem elektro-optisehen System gemäß der Erfindung
konstruiert ist. Die Probenzelle 1 weist, zwei entgegengesetzte paral-
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lele Platten oder Flächen 3 und 5 auf, die aus klarem Kunststoff bestehen
können und auf geeignete Weise, z.B. durch Ultraschall schweißung, zu einer einheitlichen Struktur verbunden sind, die Seitenränder 7 und 9 sowie einen
oberen Rand 11 und einen unteren Rand 13 aufweist. Die Seitenränder 7 und 9 können geringfügig zulaufen und der Seitenrand 9 ist am unteren Ende bei 15
angefased, so daß die Probenzelle leicht in ein entsprechendes Fach 17
eines in Fig. 3 genauer dargestellten Magazins 19 eingesetzt werden kann.
Die Seitenränder 7 und 9 der Probenzelle enthalten jeweils
zwei Kerben oder Nuten 21, 23, 25 bzw. 27, in die federnde Vorsprünge 29,
die in den Wänden oder Kanälen 31 der verschiedenen Fächer 17 gebildet sind,
einrasten können, wenn die Probenzellen in die Fächer 17 eingesetzt sind.
Wie aus Fig. 3 ersichtlich ist, hat das Magazin 19 eine Vorderwand
33, eine Rückwand 35 sowie Seitenwände 37 und 39. Längs einer Hauptachse
des Magazins 19 ist eine Reihe von im wesentlichen U-förmigen Trennwänden
41 in Abständen voneinander angeordnet. Die Trennwände sind mit den Seitenwänden 37 und 39 verbunden oder an diese angeformt und bilden die
Fächer 17 des Magazins.
Die Seitenwand 39 ist nicht vollständig und überstreckt sich
nur über etwas mehr als die Höhe jedes Faches. Die Seitenwand 37 hat am unteren Ende innen eine Schulter 43, auf der ein Ausschnitt 45, der im unteren
Rand 13 der Probenzelle 1 gebildet ist, ruht, wenn die Probenzelle ganz in das zugehörige Fach eingesetzt ist. Durch diese Konstruktionsmaßnahme
wird zusammen mit dem Einrasten der Vorsprünge 29 in die zugehörigen Nuten 21, 23, 25 und 27 verhindert, daß die Probenzellen durch die Fächer
hindurchfallen.
Wie aus den Figuren 3 und 4 ersichtlich ist, hat das Magazin 19 außerdem seitliche Flanschteile 47 und 49, an denen das Magazin beim Einsetzen
in die Einrichtung gemäß der Erfindung oder beim Entnehmen aus dieser
Einrichtung mit den Fingern bequem erfaßt werden kann.
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Die einander gegenüberliegenden Flächen der beiden ebenen Oberflächen
oder Platten 3 und 5 sind jeweils mit einer im wesentlichen kreisförmigen
Nut oder Vertiefung versehen, die, wenn die beiden Platten in der beschriebenen Weise miteinander verbunden sind, eine Reaktionskammer 51
bilden, in der die immunologische Reaktion durchgeführt wird. Die kreisförmige
Vertiefung in der ebenen Platte 3 ist mit einer Einfüll Öffnung 53 versehen,
durch die ein Reagens und ein biologisches Fluid in die Reaktionskammer eingeführt werden können, und an die zylindrische Vertiefung der Innenseite
der ebenen Platte 5 ist in der Reaktionskammer 45 ein zum Scharfstellen
dienendes Ziel 55 angeordnet, z.B. ein angeformtes, im wesentlichen
rundes zylindrisches Element. Dieses Ziel dient dazu, das optische System auf eine Ebene scharf einzustellen, die durch die Mitte der Reaktionskammer
geht.
Die beiden ebenen Platten 3 und 5 können aus Glas oder einem geeigneten Kunststoff, wie Polystyrol, bestehen. Beide Platten können aus
transparentem Material bestehen, es genügt jedoch im Prinzip, wenn eine Platte transparent und die andere nur durchscheinend ist, in diesem Fall
wird dann die ebene Fläche oder Platte 3 aus dem durchscheinenden Material
und die Platte 5 aus dem transparenten Material hergestellt.
Um die Reagenzien und die biologischen Fluidproben in die Reaktionskanimer
einzufüllen, nimmt man die Probenzelle mit den Seitenrändern
7 und 9 (Fig. 3 und 4) zwischen die Finger und zieht sie aus dem Fach heraus,
bis die Vorsprünge 29 im Kanal 31 des betreffenden Faches in die Nuten 23 und 27 eingreifen. Das jeweilige Reagens und das biologische Fluid werden
mittels einer Pipette oder irgend einer anderen geeigneten Vorrichtung nacheinander durch die Einfüllöffnung 53 in die Reaktionskammer 51 eingeführt.
Die Probenzelle wird dann nach unten in ihr Fach gedrückt und anschließend
wird dann die nächste Probenzelle in der beschriebenen Weise mit Reagens und dem zu untersuchenden biologischen Fluid gefüllt.
Nachdem die Reaktionskammern der Probenzellen in der beschriebenen
Weise mit Reagens und biologischem Fluid gefüllt worden sind, wer-
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den die Füllungen durch langsames Drehen der Magazinanordnung um eine longitudinale Drehachse gemischt und gleichmäßig verteilt. In den Figuren 6a
bis 6d sind verschiedene.! Stellungen einer Probenzelle während der Drehung
des Magazins dargestellt. Das Ausfließen von Fluid aus der Reaktionskammer wird durch die Bildung eines toroidförmigen Meniskus verhindert, der sich
während der Drehung um die Einfüllöffnung 53 bildet (Fig» 7).
Das Magazin 19 kann von Hand gedreht werden» vorteilhafterweise
ist die Einrichtung gemäß der Erfindung jedoch so konstruiert, daß das Magazin automatisch gedreht wird, bis der gewünschte Grad von Mischung und Gleichförmigkeit erreicht ist. Die Geschwindigkeit der Drehung des Magazins kann
verschieden sein, die Oberflächenspannung des FlUssigkeitsmeniskus darf jedoch zu keiner Zeit durch die Zentrifugalkraft des Fluids in den verschiedenen Probenzellen überschritten werden. In der Praxis genügt eine langsame
Rotation des Magazins für wenige Minuten, um eine ausreichende Mischung und gleichmäßige Verteilung der Reaktionspartner in den Probenzellen zu erreichen.
Vor dem anschließend beschriebenen Abbildungsprozess wird eine
Inkubation der Inhalte der Probenzellen unter geeigneten Inkubationsbedingungen durchgeführt, die von den verwendeten Reagenzien und biologischen
Fluiden abhängen. Im allgemeinen wird es jedoch zweckmäßig sein, die Temperatur des Fluids in den verschiedenen Probenzellen bei der Inkubation für
etwa 5 bis 15 Minuten auf einem Wert zwischen etwa 25 0C und etwa 50 0C zu
halten. Bei der Inkubation können sich die in das Magazin eingesetzten Probenzellen irv einer entsprechenden Kammer der Einrichtung gemäß der Erfindung
oder gewünschtenfalls auch in einer eigenen, getrennten Inkubationskammer
befinden.
Als Reagens eignen sich für das Verfahren gemäß der Erfindung
besonders Substanzen, die im wesentlichen opak sind oder so wirken und zweckmäßigerweise kolloidale Abmessungen haben, bei spiel swei'se. fei nteil ige Holzkohle, Latexkügelchen, Glas- oder Keramikkügelchen, Kaolin, Ton, Polystyrolgranulat, Säugetier-Erythrocyten usw. Die Teilchengröße liegt vorteilhafterweise zwischen etwa 1 und etwa 5 Mikrometern, sie kann auch etwas größer
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sein. Da Latex und Holzkohle-Pulver oder -Granulat hochgradig opak und
leicht verfügbar sind, werden diese Stoffe bei der Durchführung der Erfindung als Reagenzien bevorzugt und von diesen beiden Stoffen wird derzeit
Latex als das vorteilhaftere Reagens angesehen.
Das Magazin 19 wird, wie in den Figuren 8 und 9 dargestellt ist, auf einem Förderband 57 angeordnet, das über Rollen 59 läuft, von denen
mindestens eine durch einen Motor 61 angetrieben wird. Das Förderband 57 hat eine Nase 63, die mit Vorsprüngen 65 oder Aussparungen am Magazin
zum Eingriff kommt, während dieses nach jedem Abbildungs- und Netzvorgang
um einen Schritt weitertransportiert wird. Um die einzelnen Probenzellen
auf ihrem Fach herausuheben und ία den Strahlengang zu bringen, ist die
Einrichtung gemäß der Erfindung mit einer zangenartigen Vorrichtung 67 versehen,
die ein oberes Zangen- oder Greifglied 69 sowie ein unteres Zangenoder Greifglied 71 enthält. Das urvtere Greifglied 71 hat einen integralen,
vertikal hochstehenden Arm 73, der in die Fächer des Magazins eintreten und die jeweilige Probenzelle nach oben heraus in den Strahlengang zu
drücken vermag. Das untere Zangenteil hat einen lateralen Abschnitt 75, der an einem Riemen 77 befestigt ist, der über Rollen 79 läuft, die mit einem
Motor 83 verbunden und durch diesen antreibbar sind.
Das obere und das untere Greifglied sind an einem Führungsstab 81 gelagert und normalerweise mit einem federbelasteten Bauteil 83
verbunden und durch dieses zusammengedrückt. Das Bauteil 83 enthält Federelemente
85 und 87. Das obere ZangenteiT 69 wird durch einen Anschlag 89, der sich auf dem Führungsstab 81 befindet, oberhalb der Probenzellen gehalten.
Die einzelnen Probenzellen werden dadurch in den Strahlengang
gebracht, daß der Motor 81 durch einen nichtdargestellten Schalter eingeschaltet
wird, so daß das die Zange betätigende Riementrum senkrecht nach oben läuft. Hierdurch wird der vertikal vorspringendeÄrm 73 des unteren
Greifgliedes gegen den unteren Rand der sich in der Auswerteposition befindlichen
Probenzelle gedrückt und die Probenzelle wird beim Weiterlaufen des Riemens nach oben gegen das obere Zangenglied 59 und teilweise aus dem
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Magazin heraus in den Strahlengang gedrückt, wie es in Fig. 9 strichpunktiert
dargestellt ist.
Nach dem Abbilden des Inhalts der Reaktionskammer wird die Probenzelle
durch Umsteuerung der Laufrichtung des Riemens 77 wieder in ihre ursprüngliche Lage im Magazinfach zurückgedrückt. Anschließend wird dann
der Motor 61 eingeschaltet, um das Transportband 57 in Richtung des Pfeiles in Fig. 9 zu bewegen. Wenn die Nase 63 den nächsten Vorsprung in der Magazinanordnung,
der dem nächsten Fach entspricht, erreicht, wird der Motor 61 automatisch abgestellt und der Motor 81 in Betrieb gesetzt, um die nächste
Probenzelle zur Auswertung in den Strahlengang zu bringen. Diese Vorgänge wiederholen sich für jede auszuwertende Probenzelle.
Wie in den Figuren 10 und 11 dargestellt ist, kann das elektro-optische
System der Einrichtung gemäß der Erfindung eine Strahlungsquelle, wie eine monochromatische Lichtquelle 93 enthalten, von der ein
Bündel monochromatischen Lichts auf die Probenzelle 51 und durch den Inhalt der Reaktionskammer 55 fällt. Die Fläche, die vom Lichtbündel durchsetzt
wird, enthält eine polydispergierte, im wesentlichen gleichmäßige Verteilung der markierten Indikatorteilchen, z.B. Latexteilchen, die repräsentativ
für das gesamte Reaktionsmedium in der Reaktionskammer ist.
Die Tiefe oder Dicke der Reaktionskammer 55 soll möglichst
klein sein, damit ein wesentlicher Teil der Indikatorteilchen in der Brennoder Objektebene des optischen Systems konzentriert werden, die der Bildebene
entspricht, in der die ganze Information gewonnen wird.
Das Lichtbündel von der Lichtquelle 93 kann durch einen nichtdargestellten
Kondensor kolT'imiert sein und das Lichtbündel, das die Reaktionskammer
53 durchsetzt hat, fällt auf ein Abbildungsobjektiv 95 geeigneter Brennweite. Das Abbildungsobjektiv 95 ist an einer ScharfStellvorrichtung
97 befestigt, die durch ein Getriebe aus einer Zahnstange 99 und einem Ritzel 101 verstellbar ist. Das aus dem Abbildungsobjektiv 95
austretende Lichtbündel fällt auf die Oberfläche eines Bildsensors 103 und
bildet auf dieser Bilder der agglutinierten Indikatorteilchen.
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Der Bildsensor kann eine bekannte ladungsgekoppelte Einrichtung sein, siehe z.B. die Veröffentlich "Charge-Coupled Devices" von Gilbert F.
Amalio in der Zeitschrift "Scientific American", Februar 1974, Seiten 23-33.
Die ladungsgekoppelte Einrichtung enthält einen Siliziumkörper mit einem
Raster aus zehntausend Photosensorelementen in einer Matrix von 100 χ 100 rechteckigen Abschnitten oder Mulden^und an den Rändern des Rasters sind
metallische Anschlußflecke angebracht. Wenn Licht auf die Oberfläche des Photosensor-Rasters fällt, wird die Strahlung absorbiert und Elektronenladungen
werden in einer Menge, die proportional der Beleuchtungsstärke ist, entfernt.
Bei dem Verfahren gemäß der Erfindung werden die opaken Indikatorteilchen
in dem biologischen Fluid in der Reaktionskammer 53 also in Durchsicht beleuchtet und auf die photoempfindliche Oberflähe einer ladungsgekoppelten
Bildaufnahmeeinrichtung abgebildet. Die Vergrößerung des optischen Systems wird so gewählt, daß die Bilder der nicht agglutinierten
Teilchen kleiner sind als die Fläche eines Photosensor- oder Bildelements
("Pixel"). Da die elektrischen Ausgangssignale von den Photosensorelementen
proportional dem auf ihre Oberfläche auftreffenden Lichtstrom ist, wird das
Ausgangssignal eines Photosensorelements auf das das Bild eines nicht agglutinierten
Teilchens, das kleiner als ein Pixel ist, fällt, ein elektrisches Ausgangssignal liefern, das kleiner ist als das elektrische Ausgangssignal,
das einem vollständig abschattierten Pixel oder Bildelement entspricht. Man
kann also durch ein Schwellwertkriterium alle diejenigen Bildbereiche ausscheiden,
deren elektrische Ausgangssignale unter einem vorgegebenen Schwellwert
liegen und damit die nicht agglutinierten Teilchen, d.h. Teilchen, die zwar nahe beieinander sind, aber sich nicht ganz berühren und damit zwischen
sich etwas Licht hindurchlassen.
Wenn sich mehrere Indikatorteilchen zu einem großen Aggregat
oder Klumpen zusammenballen (agglutinieren), wird das resultierende Bild
mehrere Bildelemente abschattieren, wie es in Fig. 12 dargestellt ist und wegen der dichten Zusammenbauung der agglutinierten Teilchen in allen drei
Dimensionen werden sie dunkler aussehen als ein·einzelnes Teilchen.
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Nachdem die agglutinierten Teilchen in der beschriebenen Weise auf die ladungsgekoppelte
Einrichtung abgebildet worden sind, wird letztere elektronisch
Zeile für Zeile abgefragt. Jedes Bildelement, das einem Bildabschnitt
entspricht, der dunkler ist als der Schwellenwert, wird ein elektrisches
Ladungs- oder Spannungsausgangssignal erzeugen, das eine Funktion aer Dichte
oder Helligkeit des Bildes des agglutinierten Teilchens ist. Dies ist
in Fig. 13 graphisch dargestellt, die die elektrischen Ausgangssignale
zeigt, welche den in Fig. 12 dargestellten Bildern der agglutinierten Teilchen auf der photoempfindlichen Oberfläche der ladungsgekoppelten Einrichtung
entsprechen.
Das Verfahren gemäß der Erfindung eignet sich in unvergleichlicher
Weise zur Bestimmung von Krankheitszuständen, wie Syphilis, Hepatits usw. Im allgemeinen werden bei den Verfahren die Indikatorteilchen (Latex)
mit dem der Krankheit zugeordneten Antigen überzogen. Das Antigen kann
an aer Oberfläche der Indikatorteilchen, insbesondere Latexteilchen, durch
Absorption,Adsorption, Chelation oder irgend ein anderes bekanntes Verfahren
angebracht werden und die komplementäre immunreaktive Komponente istin
der Analysensubstanz vorhanden, d.h. der biologischen Probe, z.B. Blutserum. Wenn die Probensubstanr den latexbeschichteten Teilchen zugesetzt
wird, bildet die Reaktion zwischen dem Antigen und dem Antikörper vermutlich
einen phyicochemisehen Komplex, der in einer Agglutination der Latexteilchen
resultiert. Der Grad der Agglutination hängt von der Anzahl der verfügbaren komplementären Plätze ab und die Reaktion schreitet fort, bis
alle Antigenplätze mit den Antikörpern aus der zu untersuchenden Probe
vereinigt oder besetzt sind.
In dem Reaktionsmedium bilden sich also Klumpen, d.h. agglutinierte
Teilchen unterschiedlicher Größen, wobei die Anzahl und Größe der Teilchen proportional den relativen Konzentrationen von Antigen/Antikörpern
in der Probe bzw. den Indikatorteilchen ist. Nach der Durchlichtbeleuchtung
der Reaktionskammer und Abbildung der agglutinierten .Teilchen werden die
abgebildeten Flächen (elektronisch) quantitativ erfaßt und wird die Gesamtfläche
ermittelt, welche eine Funktion der Konzentration des Antikörpers in der zu untersuchenden Probe ist.
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Das obige Verfahren kann zur qualitativen Bestimmung einer unbekannten Probe verwendet werden. Das beschriebene Verfahren kann also
für eine Referenzprobe wiederholt werden und die Gesamtflächen der dunklen Bildbereiche werden zur Bestimmung der Art der unbekannten Probe verglichen.
Um die Konzentration einer immunreaktiven Komponente in einer unbekannten biologischen Probe zu bestimmen, wird die obige Prozedur für
mindestens zwei Kontroll proben mit bekannten, jedoch verschiedenen Antikörperkonzentrationen
wiederholt, von denen eine negative Kontrolle sein kann, also ein Serum, das keine Antikörper enthält. Die Gesamtfläche der dunklen
Bereiche der Kontrallproben werden dann mit den jeweiligen Konzentrationen
in Beziehung gesetzt. Die Antikörperkonzentration in der unbekannten Probe
kann dann aufgrund der Gesamtfläche der dunklen Bereiche ermittelt werden, die sich für die unbekannte Probe ergibt, und die Abhängigkeit der Gesamtflächen
der dunklen Bereiche der KontrolTproben von den jeweiligen Konzentrationen.
Ein Ausführungsbeispiel eines elektrooptischen Systems für eine Einrichtung gemäß der Erfindung ist in Fig. 14 in einem Blockdiagramm
dargestellt. Ein Bündel monochromatischen Lichts von der Lichtquelle 93 fällt durch eine Probenquelle 51. Das durch die Probenquelle gefallene Licht
wird durch das Abbildungsobjektiv 95 auf die Bildaufnahmefläche der ladungsgekoppelten
Einrichtung 103 fokussiert. Das Ausgangssignal der ladungsgekoppelten
Einrichtung wird auf zwei Leitungen 105 und 107 verzweigt. Aus dem Signal auf der ersten Leitung 105 werden gemittelte Werte für eine Intensitätsrückführungssteuerung
106 gewonnen, während das Signal auf der zweiten Leitung 107 zur Gewinnung der Daten für die Bestimmung der Teilchengröße
und ihrer Häufigkeit (Frequenz des Auftretens) dient.
Die zweite Leitung 107 führt zu einer Schwellwertvergleich-
und Teilchenzählerschaltung 109r in der die nicht aggltttinierten Teilchen
sowohl aufgrund der Intensität als auch aufgrund der Teilchengröße aussortiert werden. &ie Schaltungsanordnung 109 läßt Signale durch, die dicht
zusammengeklumpten Teilchen (also agglutinierten Teilchen) entsprechen»
die sehr dunkle Bilder auf der ladungsgekoppelten Einrichtung 103 erzeugen,
030035/0010
im Gegensatz zu den grauen Bildern, die von nicht agglutinierten Teilchen resultieren,
ferner werden Werte eliminiert, die nicht scharf abgebildeten Teilchen beruhen.
Das serielle Ausgangssignal von der ladungsgekoppelten Einrichtung
103 wird durch eine Kathodenstrahl bildröhre 117 zu einem Bild der Reaktionszone
zusammengesetzt; auf dem Bildschirm der Kathodenstrahlröhre 117
wird also ein Bild der Probe erzeugt, aufgrund dessen die Funktion der Einrichtung
überwacht werden kann.
Die Temperatur der Inhalte der Probenzellen wird durch einen
Temperaturregler 113 überwacht und auf einem vorgegebenen optimalen Wert gehalten.
Die in Fig. 14 dargestellte Einrichtung enthält ferner einen Digitalrechner
115 und einen Steuerteil 117 zur überwachung und Steuerung der hauptsächlichen Funktionen der Einrichtung und verschiedenen Vorrichtungen.
Ferner dient der Digitalrechner 115 auch gewünschtenfalls zu einer Aufbereitung
der Daten. Die Ausgangsdaten des Digitalrechners können in einem Speicher 119 gespeichert und/oder durch ein Druckwerk 121 ausgedruckt werden.
Im folgenden werden nun einige Ausführungsbeispiele des vorliegenden
Verfahrens näher erläutert. Diese Beispiele sind selbstverständlich
für den Gegenstand der Erfindung oder die Anwendbarkeit auf bestimmte Krankheiten
nicht einschränkend auszulegen.
030035/0010
Anhand dieses Beispieles wird die Anwendbarkeit des Verfahrens und der Einrichtung gemäß der Erfindung auf Syphilis beschrieben.
60 Mikroliter RPR (Rapid Plasma Reagent) Holzkohle-Antigen-Suspension
(HWD), ein von der Regierung erhältliches Reagens, das vom Venereal Disease Reagent Laboratory hergestellt wird, wurden in jeweils 30 Probenzellen
pipettiert, die in drei Magazinen der oben beschriebenen Art untergebracht waren. In die Probenzellen 1 bis 4 wurden ferner zusätzlich 40
Mikroliter der folgenden Kontrollsera eingeführt (die von an Syphilis erkrankten
Patienten gewonnen worden waren):
Probenzelle No. STD Serum RPR Card Titer *
1 stark reaktionsfähig 8
2 mäßig reaktionsfähig 4
3 schwach reaktionsfähig 1
4 nicht reaktionsfähig 0
* HWD und RPR sind beispielsweise in der erwähnten US-PS 3 074 853 genauer
beschrieben.
Die verbleibenden 26 Probenzellen wurden jeweils mit zusätzlichen 40 Mikrolitern Serum von zu untersuchenden Patienten beschickt, bei
denen ein Verdacht auf Syphilis bestand, und die Probenzellen wurden einer
Inkubation unterworfen, in dem sie 8 Minuten bei 30 0C in den sie enthaltenden
Magazinen langsam rotiert wurden. Der Grad der Agglutination der Substanzen in den verschiedenen Zellen wurde, dann mittels der oben beschriebenen
Einrichtung und des oben beschriebenen Verfahrens bestimmt; die Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle I aufgeführt:
030035/00 10-
Probe Nr. | Maschineller Meßwert in | Manuelle (Visuelle) | - | - - |
Agglutinations-Einheiten (Fläche) |
Zählung mit Karte | _ | ||
1 (Kontrolle) | 1500 | +8 | ||
2 (Kontrolle) | 945 | +4 | - | |
3 (Kontrolle) | 125 | + 1 | ||
4 (Negativ-Kontrolle) | 45 | - | ||
5 | T99 | + 1 | _ | |
6 | 45 | _ | +8 | |
7 | 59 | |||
8 | 4^ | _ | ||
9 | 37 | |||
1Q | 32 | _ | ||
It | 998 | +4 | ||
12 | 38 | - | ||
13 | 39 | _ | ||
14 | 54 | |||
15 | 76 | _ | ||
16 | 21 | — | ||
17 | 94 | _ | ||
18 | 22 | |||
19 | 450 | +2 | ||
20 | 1495 | +8 | ||
21 | 36 | |||
22 | 29 | |||
23 | 42 | |||
24 | 59 | |||
25 | 65 | |||
26 | 32 | |||
27 | 54 | |||
28 | 1315 | |||
29 | 21 | |||
30 |
Eie die Tabelle I zeigt, können die verschiedenen Zählwerte mit den Kontroll proben verglichen werden, um die Stärke der Erkrankung in den
Proben zu bestimmen. Die Werte der Probe Nr. 5 zeigen beispielsweise eine
schwache Reaktion und damit nur einen sehwachen Krankheitszustand; die Proben
NK 6 bis 10 sind hinsichtlich Syphilis ohne Befund; die Probe Nr. 11
zeigt eine mäßige Reaktion und die Proben Nr. 20 und 28 eine starke Reaktion,
also eine starke Erkrankung. Aus den erhaltenen ResuTtaten können ferner
auch quantitative Angaben irr Form von Prozenten bezogen auf die positive
035/0010
X 100
1500
Der für Probe Nr. 10 maschinell ermittelte Wert 998 bedeutet
beispielsweise daß die Konzentration in der verdächtigen Probe (998/1500) χ
100 oder 66,53 % der positiven Kontrolle der Probe 1 beträgt. Nachdem also
einmal die Konzentration der positiven Kontrollprobe bekannt ist, kann der
Grad des Krankheitszustandes in der Testprobe durch das Verfahren und die
Einrichtung gemäß der Erfindung leicht ermittelt werden.
Dieses Beispiel betrifft die Prüfung auf humanes chorionisches Gonadotropin (HCG) zur Schwangerschaftsfeststenung.
75 Milliliter Anti-HCG/LatexkügeTchen-Reagenssuspension (HWD) wurden mit einer Pipette in zehn Probenzellen eingeführt, die sich in einem
Magazin der oben beschriebenen Art befanden. In zwei Zellen wurden zur Kontrolle
25 Mikroliter Urin zugesetzt, die einen mit bekannter Reaktivität und die anderen mit unbekannter Reaktivität. In die restlichen Zellen wurden
jeweils 25 Mikroliter Probe eingeführt. Das Magazin mit den Probezellen wurde dann zur Inkubation unter langsamer Rotation 8 Minuten auf 28 0C
gehalten und die Inhalte der Probenzellen wurden dann durch eine Einrichtung der oben beschriebenen Art unter Anwendung des Verfahrens gemäß der Erfindung
ausgewertet. Die Resultate sind in der folgenden Tabelle II aufgeführt:
030035/0010
Tabelle II | Titer (HCG) Int.-Einheiten(IU) |
|
Probe Nr. | Maschineller Meßwert Agglutinations-Einheiten (Fläche) c |
2.5 2,0 0,1 0,06 1.5 |
1 (Kontrolle) 2 (Negativ-Kontrolle) 3 4 5 6 7 8 |
1627 0 1493 122 22 0 1400 3 |
|
030035/0010
Leerseite
Claims (4)
1) Probenzelle für Fluide oder flüssige Reagenzien, dadurch
gekennzeichnet, daß sie zwei einander gegenüberliegende
parallele ebene Flächen oder Platten aufweist, daß sich in jeder der Flächen eine im wesentlichen kreisförmige Nut oder Vertiefung befindet,
so daß, wenn die Flächen unter Bildung einer einheitlichen Struktur miteinander verbunden sind, die Vertiefungen eine Reaktionskammer bilden,
und daß eine der kreisförmigen Vertiefungen eine Öffnung oder Durchbrechung
(53) zum Einführen der fluiden oder flüssigen Reagenzien in die Reaktionskammer aufweist.
2) Probenzelle nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Probenzelle aus zwei Platten aus transparentem Material besteht.
030 0-3 5/0010
3) Einrichtung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Probenzelle
aus einer Platte aus transparentem Material und einer Platte aus durchscheinendem Material besteht.
4) Einrichtung nach einem der Ansprüche 1, 2 oder 3, dadurch gekennzeichnet,
daß an der Innenfläche einer der kreisförmigen Vertiefungen ein vorzugsweise im wesentlichen zylindrischer Vorsprung angeordnet ist, der
eine Fläche aufweist, die in einer Mittelebene der Reaktionskammer liegt und als Ziel für die Scharfeinstellung eines optischen Systems dienen kann.
030035/0010
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US05/835,996 US4197088A (en) | 1977-09-23 | 1977-09-23 | Method for qualitative and quantitative determination of immunological reactions |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE2857625A1 true DE2857625A1 (de) | 1980-08-28 |
Family
ID=25270968
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE19782853836 Granted DE2853836A1 (de) | 1977-09-23 | 1978-12-13 | Verfahren und einrichtung zum bestimmen einer immunreaktionskomponente |
DE19782857625 Ceased DE2857625A1 (de) | 1977-09-23 | 1978-12-13 | Probenzelle |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE19782853836 Granted DE2853836A1 (de) | 1977-09-23 | 1978-12-13 | Verfahren und einrichtung zum bestimmen einer immunreaktionskomponente |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4197088A (de) |
AU (2) | AU1297783A (de) |
CA (1) | CA1119426A (de) |
DE (2) | DE2853836A1 (de) |
FR (1) | FR2444939A1 (de) |
GB (1) | GB2040441B (de) |
NL (1) | NL7812584A (de) |
SE (1) | SE440404B (de) |
Families Citing this family (61)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4252538A (en) * | 1979-03-02 | 1981-02-24 | Engineering & Research Associates, Inc. | Apparatus and method for antibody screening, typing and compatibility testing of red blood cells |
US4810629A (en) * | 1980-07-18 | 1989-03-07 | Fairleigh Dickinson Laboratories, Inc. | Identification of viral associated immunoreactants in biological fluids |
FR2488691A1 (fr) * | 1980-08-14 | 1982-02-19 | Commissariat Energie Atomique | Procede et dispositif pour la detection et la quantification d'agglutinats en temps reel |
JPS57142548A (en) * | 1981-02-27 | 1982-09-03 | Dainippon Screen Mfg Co Ltd | Photographic density detector for film |
US4476231A (en) * | 1981-07-22 | 1984-10-09 | International Remote Imaging Systems, Inc. | Method of analyzing the distribution of a reagent between particles and liquid in a suspension |
EP0087466B1 (de) * | 1981-09-08 | 1988-01-20 | EASTMAN KODAK COMPANY (a New Jersey corporation) | Verfahren und vorrichtung zum aufspüren von probeflüssigkeiten |
US4409012A (en) * | 1982-02-16 | 1983-10-11 | Owens-Illinois, Inc. | Method and apparatus for monitoring a glass furnace |
JPS5998709A (ja) * | 1982-11-29 | 1984-06-07 | Olympus Optical Co Ltd | 粒子凝集パタ−ン判定方法 |
FR2545610B1 (fr) * | 1983-05-02 | 1989-04-21 | Materiel Biomedical | Procede et dispositif pour la detection et la quantification d'agglutinats |
JPH07114685B2 (ja) * | 1983-07-28 | 1995-12-13 | 株式会社日立製作所 | 下水処理装置 |
JPS6086468A (ja) * | 1983-10-18 | 1985-05-16 | Olympus Optical Co Ltd | 抗原抗体反応の判定方法 |
FR2555754A1 (fr) * | 1983-11-28 | 1985-05-31 | Inter Inf | Procede et dispositif d'analyse automatique d'echantillons biologiques |
US5114860A (en) * | 1984-10-09 | 1992-05-19 | Toa Medical Electronics Co., Ltd. | Device of measuring a blood coagulating time |
JPS61228355A (ja) * | 1985-04-03 | 1986-10-11 | Green Cross Corp:The | 凝集反応の自動検出方法及び装置 |
GB8513538D0 (en) * | 1985-05-29 | 1985-07-03 | Mackay C D | Electrophoresis |
US4682890A (en) * | 1985-05-31 | 1987-07-28 | Health Research, Incorporated | Microsample holder and carrier therefor |
US4888484A (en) * | 1986-02-20 | 1989-12-19 | Automatik Machinery Corporation | Apparatus and method for spectrophotometric analysis of a material in a moving process stream |
EP0266881A3 (de) * | 1986-09-30 | 1990-04-04 | Astromed Limited | Verfahren und Vorrichtung für optische Mehrfachprüfung |
FR2604526B1 (fr) * | 1986-09-30 | 1990-12-21 | Indicia Ste Civile Etu Rech | Procede et dispositif de dosage de substances d'interet clinique reactives immunologiquement |
US5093271A (en) * | 1986-11-28 | 1992-03-03 | Shimadzu Corporation | Method for the quantitative determination of antigens and antibodies by ratio of absorbances at different wavelengths |
US4963024A (en) * | 1988-07-07 | 1990-10-16 | Kaman Aerospace Corporation | Method and apparatus for determining K factor |
ES2085854T3 (es) * | 1988-08-02 | 1996-06-16 | Abbott Lab | Metodo y dispositivo de produccion de datos de calibrado para analisis. |
AU635269B2 (en) * | 1989-05-03 | 1993-03-18 | Abbott Laboratories | Method of forming agglutinates in blood samples |
US4967270A (en) * | 1989-05-08 | 1990-10-30 | Kaman Aerospace Corporation | Lidar system incorporating multiple cameras for obtaining a plurality of subimages |
DE3919260A1 (de) * | 1989-06-13 | 1990-12-20 | Hoechst Ag | Verfahren zum quantitativen auswerten von agglutinationsreaktionen |
AU636384B2 (en) * | 1989-09-06 | 1993-04-29 | Toa Medical Electronics Co., Ltd. | Synthetic apparatus for inspection of blood |
US5034810A (en) * | 1989-12-07 | 1991-07-23 | Kaman Aerospace Corporation | Two wavelength in-situ imaging of solitary internal waves |
US5036861A (en) * | 1990-01-11 | 1991-08-06 | Sembrowich Walter L | Method and apparatus for non-invasively monitoring plasma glucose levels |
US5487112A (en) * | 1990-02-20 | 1996-01-23 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Method and apparatus for time-resolved measurements of lymphocyte function and aggregate structure using computer-automated microscopy |
US6187572B1 (en) | 1990-04-16 | 2001-02-13 | Baxter International Inc. | Method of inactivation of viral and bacterial blood contaminants |
US5418130A (en) * | 1990-04-16 | 1995-05-23 | Cryopharm Corporation | Method of inactivation of viral and bacterial blood contaminants |
US5231401A (en) * | 1990-08-10 | 1993-07-27 | Kaman Aerospace Corporation | Imaging lidar system |
US5270780A (en) * | 1991-09-13 | 1993-12-14 | Science Applications International Corporation | Dual detector lidar system and method |
US5681530A (en) * | 1993-06-11 | 1997-10-28 | Ortho Diagnostic Systems Inc. | Transport system for fluid analysis instrument |
US5594808A (en) * | 1993-06-11 | 1997-01-14 | Ortho Diagnostic Systems Inc. | Method and system for classifying agglutination reactions |
US6267722B1 (en) | 1998-02-03 | 2001-07-31 | Adeza Biomedical Corporation | Point of care diagnostic systems |
US6394952B1 (en) * | 1998-02-03 | 2002-05-28 | Adeza Biomedical Corporation | Point of care diagnostic systems |
USD434153S (en) * | 1998-04-20 | 2000-11-21 | Adeza Biomedical Corporation | Point of care analyte detector system |
USD432244S (en) * | 1998-04-20 | 2000-10-17 | Adeza Biomedical Corporation | Device for encasing an assay test strip |
US6514770B1 (en) * | 1999-07-30 | 2003-02-04 | Mitsubishi Chemical Corporation | Immunoassay |
US7197169B2 (en) * | 2003-01-02 | 2007-03-27 | Kuo-Jeng Wang | Method for detecting a response of each probe zone on a test strip |
US8789756B2 (en) * | 2006-02-25 | 2014-07-29 | Roche Diagnostics Operations, Inc. | Test element coding apparatuses, systems and methods |
EP1826705A1 (de) * | 2006-02-25 | 2007-08-29 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Analytisches Verbrauchsmittel und Anordnung zum Auslesen von Informationen |
JP5239128B2 (ja) * | 2006-05-22 | 2013-07-17 | 株式会社ニコン | 観察装置 |
EP2265945B1 (de) * | 2008-03-21 | 2012-11-07 | Abbott Point Of Care, Inc. | Verfahren und vorrichtung zur bestimmung von rote-blutzellen-indizes einer blutprobe unter nutzung der intrinsischen pigmentierung von in den roten blutzellen enthaltenem hämoglobin |
CN102027369B (zh) * | 2008-03-21 | 2018-10-26 | 艾博特健康公司 | 单独和在聚合凝块中检测和计数血小板的方法及设备 |
CA2718992C (en) | 2008-03-21 | 2013-04-30 | Abbott Point Of Care, Inc. | Method and apparatus for determining the hematocrit of a blood sample utilizing the intrinsic pigmentation of hemoglobin contained within the red blood cells |
EP2269038B1 (de) * | 2008-03-21 | 2016-07-27 | Abbott Point Of Care, Inc. | Verfahren zur analyse individueller zellen oder partikel in blut anhand von fluoreszenz und absorption eines färbemittels |
US8045165B2 (en) | 2008-03-21 | 2011-10-25 | Abbott Point Of Care, Inc. | Method and apparatus for determining a focal position of an imaging device adapted to image a biologic sample |
US7995194B2 (en) | 2008-04-02 | 2011-08-09 | Abbott Point Of Care, Inc. | Virtual separation of bound and free label in a ligand assay for performing immunoassays of biological fluids, including whole blood |
WO2009126800A1 (en) * | 2008-04-09 | 2009-10-15 | Abbott Point Of Care, Inc. | Method for measuring the area of a sample disposed within an analysis chamber |
EP2281197B1 (de) * | 2008-04-09 | 2015-09-02 | Abbott Point Of Care, Inc. | Verfahren zum nachweisen sehr geringer analytniveaus in einer dünnschichtkammer enthaltenen dünnfilmfluidprobe |
US8422740B2 (en) | 2009-01-15 | 2013-04-16 | Scott Dylewski | Methods for determining a liquid front position on a test strip |
US8692873B2 (en) | 2009-01-15 | 2014-04-08 | Alverix, Inc. | Video-frame data receiver with low frame capture rate |
US20100255605A1 (en) * | 2009-04-02 | 2010-10-07 | Abbott Point Of Care, Inc. | Method and device for transferring biologic fluid samples |
WO2011082342A1 (en) * | 2009-12-31 | 2011-07-07 | Abbott Point Of Care, Inc. | Method and apparatus for determining mean cell volume of red blood cells |
WO2011116305A1 (en) | 2010-03-18 | 2011-09-22 | Abbott Point Of Care, Inc. | Method and apparatus for optically determining at least one hemoglobin related parameter of a whole blood sample |
US10295472B2 (en) | 2010-05-05 | 2019-05-21 | Alverix, Inc. | Assay reader operable to scan a test strip |
US9389229B2 (en) | 2012-07-18 | 2016-07-12 | Theranos, Inc. | Methods for detecting and measuring aggregation |
US11009504B2 (en) * | 2017-01-31 | 2021-05-18 | Maxim Integrated Products. Inc. | System and method for performing an assay with sub-pixel sized beads |
WO2020141463A2 (en) * | 2019-01-03 | 2020-07-09 | Pixcell Medical Technologies Ltd. | Systems and methods for analyzing a fluid sample |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE2007405B2 (de) * | 1969-03-19 | 1972-10-19 | American Optical Corp , Southbnd ge, Mass (V StA) | Vorrichtung fuer die kolorimetrische serienanalyse von fluessigkeiten |
DE2166461A1 (de) * | 1970-05-06 | 1974-05-16 | Worthington Biochem Corp | Reaktionsbehaelter fuer den einmaligen gebrauch |
Family Cites Families (27)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3395210A (en) * | 1964-02-07 | 1968-07-30 | Warner Lambert Pharmaceutical | Lyophilized diagnostic reagent for the determination of blood coagulation factors |
US3520609A (en) * | 1966-07-21 | 1970-07-14 | Pfizer & Co C | Method and apparatus for detecting agglutination reactions |
US3463614A (en) * | 1966-11-29 | 1969-08-26 | Cutler Hammer Inc | Method and apparatus for use in promoting agglomeration |
FR95147E (fr) * | 1967-05-12 | 1970-07-24 | Centre Nat Rech Scient | Appareillage destiné plus particulierement a la détermination automatique des groupes sanguins. |
FR2088139B1 (de) * | 1970-05-22 | 1973-06-08 | Philips France | |
US3770380A (en) * | 1971-04-19 | 1973-11-06 | Us Army | Article and method for multiple immune adherence assay |
DE2156655A1 (de) * | 1971-11-15 | 1973-05-24 | Max Planck Gesellschaft | Verfahren zur messung der agglutination von biologischen zellstrukturen und einrichtung zur durchfuehrung des verfahrens |
US3853468A (en) * | 1972-05-08 | 1974-12-10 | H Haymond | Method and apparatus for clinical testing of biological fluids |
US3826613A (en) * | 1973-03-06 | 1974-07-30 | Us Navy | Detection and titration of viruses and antibodies using latex |
US4027973A (en) * | 1973-07-02 | 1977-06-07 | Beckman Instruments, Inc. | Detector apparatus for laser light scattering photometers |
US3905767A (en) * | 1974-01-30 | 1975-09-16 | Miles Lab | Process for qualitative analysis or quantitation of antigens or antibodies |
DE2409273A1 (de) * | 1974-02-27 | 1975-09-04 | Behringwerke Ag | Verfahren und vorrichtung zum messen von antigen-antikoerper-reaktionen |
US4052010A (en) * | 1974-03-01 | 1977-10-04 | Corning Glass Works | Suspendable porous glass particles |
US3932141A (en) * | 1974-07-10 | 1976-01-13 | Abbott Laboratories | Apparatus for determining immunoassays of antigens and their antibodies |
US3915640A (en) * | 1974-08-06 | 1975-10-28 | Warner Lambert Co | Method and composition for detecting fibrin monomers and fibrin degradation products |
US4075462A (en) * | 1975-01-08 | 1978-02-21 | William Guy Rowe | Particle analyzer apparatus employing light-sensitive electronic detector array |
US3967901A (en) * | 1975-01-29 | 1976-07-06 | Baxter Laboratories, Inc. | Nephelometer having means semiautomatically cancelling components from scattering by particles smaller or larger than those of interest |
US4097149A (en) * | 1975-02-03 | 1978-06-27 | Aladjem Frederick J | Quantitative protein analysis by immunodiffusion |
US4050895A (en) * | 1975-09-26 | 1977-09-27 | Monsanto Research Corporation | Optical analytical device, waveguide and method |
SE399768B (sv) * | 1975-09-29 | 1978-02-27 | Lilja Jan E | Kyvett for provtagning, blandning av, provet med ett reagensmedel och direkt utforande av, serskilt optisk, analys av det med reagensmedlet blandade provet |
US3984533A (en) * | 1975-11-13 | 1976-10-05 | General Electric Company | Electrophoretic method of detecting antigen-antibody reaction |
US4080264A (en) * | 1976-03-01 | 1978-03-21 | Massachusetts Institute Of Technology | Immunoassay by light scattering spectroscopy |
US4118280A (en) * | 1976-05-03 | 1978-10-03 | Mcdonnell Douglas Corporation | Automated microbial analyzer |
US4043669A (en) * | 1976-05-28 | 1977-08-23 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Air Force | Light scattering test apparatus |
US4003988A (en) * | 1976-06-01 | 1977-01-18 | Warner-Lambert Company | Direct agglutination test for pregnancy |
JPS5811575B2 (ja) * | 1976-08-16 | 1983-03-03 | 帝国臓器製薬株式会社 | 抗原−抗体反応の測定法 |
US4136953A (en) * | 1977-07-19 | 1979-01-30 | Beckman Instruments, Inc. | Nephelometer with detection system focused on optical dark region |
-
1977
- 1977-09-23 US US05/835,996 patent/US4197088A/en not_active Expired - Lifetime
-
1978
- 1978-12-04 CA CA000317297A patent/CA1119426A/en not_active Expired
- 1978-12-04 SE SE7812469A patent/SE440404B/sv not_active IP Right Cessation
- 1978-12-13 DE DE19782853836 patent/DE2853836A1/de active Granted
- 1978-12-13 DE DE19782857625 patent/DE2857625A1/de not_active Ceased
- 1978-12-18 FR FR7835538A patent/FR2444939A1/fr active Granted
- 1978-12-27 NL NL7812584A patent/NL7812584A/nl not_active Application Discontinuation
-
1979
- 1979-01-11 GB GB7901002A patent/GB2040441B/en not_active Expired
-
1983
- 1983-03-29 AU AU12977/83A patent/AU1297783A/en not_active Abandoned
- 1983-03-29 AU AU12978/83A patent/AU546615B2/en not_active Expired
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE2007405B2 (de) * | 1969-03-19 | 1972-10-19 | American Optical Corp , Southbnd ge, Mass (V StA) | Vorrichtung fuer die kolorimetrische serienanalyse von fluessigkeiten |
DE2166461A1 (de) * | 1970-05-06 | 1974-05-16 | Worthington Biochem Corp | Reaktionsbehaelter fuer den einmaligen gebrauch |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU546615B2 (en) | 1985-09-12 |
NL7812584A (nl) | 1980-07-01 |
AU1297883A (en) | 1983-07-28 |
FR2444939A1 (fr) | 1980-07-18 |
DE2853836A1 (de) | 1980-07-17 |
CA1119426A (en) | 1982-03-09 |
SE440404B (sv) | 1985-07-29 |
GB2040441A (en) | 1980-08-28 |
FR2444939B1 (de) | 1984-04-27 |
GB2040441B (en) | 1983-06-15 |
US4197088A (en) | 1980-04-08 |
DE2853836C2 (de) | 1987-10-08 |
SE7812469L (sv) | 1980-08-29 |
AU1297783A (en) | 1983-07-28 |
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